Penilaian OSCE Bakteriologi D3 TLM

#1

Actual Mark: Pewarnaan Gram

Stasiun 1: Identifikasi Mikroskopis Bakteriologi

"Daftar tilik kompetensi fundamental D3 TLM. Ingat! Kesalahan di sini berdampak pada kesalahan terapi antibiotik!"

A. PRA-ANALITIK (Persiapan)

1 Pemakaian APD

"Menggunakan jas laboratorium terkancing, sarung tangan (handscoon), dan masker dengan benar sebelum menyentuh spesimen."

Standar K3 Laboratorium Mikrobiologi untuk mencegah infeksi nosokomial.

Bobot: 1

2 Desinfeksi Awal

"Membersihkan meja kerja dengan disinfektan (alkohol 70% / hipoklorit) sebelum memulai pekerjaan."

Meminimalkan kontaminasi lingkungan terhadap spesimen.

Bobot: 1

3 Pelabelan Kaca Objek

"Memberi label kode/identitas pada bagian frosted kaca objek."

Mencegah specimen mix-up (kesalahan identitas pasien).

Bobot: 1

KRITIS!

4 Sterilisasi Ose

"Membakar ose pada api Bunsen hingga memijar (merah) dan mendinginkannya sejenak sebelum mengambil koloni."

Ose panas membunuh bakteri (hasil negatif palsu). Tidak memijar menyebabkan kontaminasi silang.

Bobot: 3 (Double)

B. ANALITIK (Pewarnaan)

5 Pembuatan Smear

"Membuat apusan bakteri setipis selapis sel (monolayer), bentuk oval/bulat, diameter ±1-2 cm."

Apusan tebal menyebabkan penumpukan zat warna (hasil variabel/ambigu).

Bobot: 2

KRITIS!

6 Fiksasi

"Melakukan fiksasi dengan melewatkan preparat kering udara di atas api 3-4 kali (hangat kuku)."

Fiksasi merekatkan bakteri ke kaca dan membuka pori dinding sel. Overheating merusak morfologi sel.

Bobot: 3 (Double)

7 Primary Stain (Kristal Violet)

"Menggenangi preparat selama 1 menit, cuci dengan air mengalir perlahan."

Semua sel (Gram +/-) menyerap zat warna basa ini.

Bobot: 2

8 Mordant (Lugol/Iodine)

"Menggenangi preparat selama 1 menit, cuci dengan air mengalir."

Membentuk kompleks CV-I (Crystal Violet-Iodine) yang besar di dalam sitoplasma.

Bobot: 2

FATAL ERROR!

9 Dekolorisasi (Alkohol)

"Meneteskan peluntur tetes demi tetes sampai lunturan jernih (±5-10 detik), segera cuci air."

Tahap paling kritis. Over-decolorization membuat Gram (+) jadi merah (falsely negative). Under membuat Gram (-) jadi ungu.

Bobot: 4 (FATAL)

10 Counterstain (Safranin)

"Menggenangi selama 30-45 detik, cuci air, keringkan dengan bibulous paper atau udara."

Memberi warna merah pada sel Gram negatif yang telah luntur.

Bobot: 2

C. PASCA-ANALITIK

11 Mikroskopi (Oil Imersi)

"Menggunakan minyak imersi pada lensa objektif 100x tanpa menabrak preparat."

Indeks bias minyak imersi meningkatkan resolusi dan mencegah bias cahaya.

Bobot: 2

RESULT!

12 Interpretasi Hasil

"Melaporkan Bentuk (kokus/basil), Susunan (cluster/chain), dan Sifat Gram (Positif/Negatif) dengan benar."

Tujuan akhir pemeriksaan. Kesalahan interpretasi membuat seluruh prosedur sia-sia.

Bobot: 4 (KRITIS)

13 Pengelolaan Limbah

"Membuang sisa reagen cair ke wadah limbah kimia dan benda tajam/kaca ke Safety Box."

Kepatuhan manajemen limbah B3.

Bobot: 1

TOTAL SKOR MAKSIMUM

28 POIN

Catatan: Jika gagal pada item FATAL (Dekolorisasi), nilai otomatis 0 (Critical Error).

#2

ACTUAL MARK

STASIUN BAKTERIOLOGI UTAMA

Stasiun 2: Uji Kepekaan Antibiotik (Metode Kirby-Bauer)

Fokus Kompetensi: Keterampilan teknik aseptik tingkat lanjut dan standarisasi inokulum yang ketat sesuai panduan CLSI/EUCAST.
Dokumen ini menguraikan daftar tilik (checklist) teknis berdasarkan prosedur standar dan analisis keselamatan kerja.

#1

Standarisasi Inokulum

YA (Skor 1)

Membandingkan kekeruhan suspensi bakteri dengan standar McFarland 0.5 pada latar belakang kertas putih bergaris hitam (Wickerham card).

TIDAK (Skor 0)

Tidak membandingkan, atau kekeruhan jelas tidak setara (terlalu encer atau terlalu pekat).

Insight Klinis: Standarisasi 0.5 McFarland setara dengan approx 1.5 x 10^8 CFU/mL. Jika inokulum terlalu encer, zona hambat bisa false sensitive. Jika terlalu pekat, zona hambat bisa false resistant.

#2

Teknik Swabbing (Hukum 3 Arah)

YA (Skor 1)

Mencelupkan lidi kapas steril, memeras kelebihan cairan di dinding tabung, lalu mengusap permukaan MHA (Mueller Hinton Agar) dalam 3 arah berbeda (rotasi 60°) hingga merata menutup seluruh permukaan + 1 kali putaran cincin (rim) cawan.

TIDAK (Skor 0)

Tidak memeras kapas (terlalu basah), tidak meratakan ke seluruh permukaan (ada celah), atau merobek agar saat mengusap.

Note: Lidi kapas yang terlalu basah menyebabkan kelembaban berlebih yang memfasilitasi "swarming" bakteri atau zona hambat yang tidak beraturan.

#3

Aplikasi Disk Antibiotik

YA (Skor 1)

Meletakkan disk antibiotik dengan pinset steril (dibakar alkohol) atau dispenser. Jarak antar disk minimal 24mm (pusat ke pusat) dan jarak dari tepi 15mm.

TIDAK (Skor 0)

Disk terlalu berdekatan (zona akan menyatu), disk jatuh di luar area inokulasi, atau pinset tidak disterilkan.

#4

Kontak Disk

YA (Skor 1)

Menekan disk secara perlahan dengan pinset steril agar menempel sempurna pada permukaan agar (tidak bergeser saat dibalik).

TIDAK (Skor 0)

Tidak ditekan (disk jatuh saat cawan dibalik), atau menekan terlalu kuat hingga disk tenggelam/agar rusak.

#5

Proses Inkubasi

YA (Skor 1)

Membalik cawan petri (tutup di bawah) dan menempatkan di inkubator dalam waktu < 15 menit setelah pemasangan disk.

TIDAK (Skor 0)

Cawan tidak dibalik (kondensasi jatuh ke agar), atau membiarkan cawan di suhu ruang terlalu lama (menyebabkan predifusi antibiotik berlebih).

© 2024 Laboratorium Mikrobiologi - Panduan Visual Actual Mark

#3

Stasiun 3: Isolasi Bakteri

Metode Cawan Gores / Streak Plate

Fokus utama stasiun ini adalah mendapatkan koloni terpisah (single colony) untuk identifikasi murni.

1

Teknik Aseptik Zona Api 17

Melakukan seluruh pekerjaan dalam radius ±20-30 cm dari api Bunsen. Membuka cawan petri hanya seperlunya (seperti mulut buaya) untuk menghindari kontaminasi udara.

2

Pengambilan Sampel 32

Mendinginkan ose sebelum menyentuh kultur stok. Mengambil inokulum secukupnya (tidak terlihat gumpalan besar).

3

Streaking Kuadran I

Menggoreskan inokulum pada area kuadran 1 dengan gerakan zig-zag rapat.

KRITIS!

4

Sterilisasi Antar Kuadran

"Membakar ose dan mendinginkannya setiap kali berpindah dari Kuadran 1 ke 2, dan 2 ke 3."

Ini adalah kunci pengenceran mekanis.

5

Kontinuitas Goresan

"Menggores area kuadran berikutnya dengan menyentuh sedikit (1-2 kali) area kuadran sebelumnya, lalu menjauh (tidak kembali lagi ke area padat)."

6

Integritas Media

"Permukaan agar tetap mulus, tidak terobek oleh ose."

Menunjukkan kontrol motorik halus yang baik dan sudut kemiringan ose yang tepat.

© Laboratorium Mikrobiologi - Isolasi Bakteri Project

#4

OSCE BAKTERIOLOGI

GLOBAL RATING SCALE (GRS)

"Standar Kompetensi Profesional D3 TLM"

KONSEP DASAR

Jika daftar tilik menilai "kelengkapan", maka GRS menilai "kompetensi profesional".

Untuk memastikan reliabilitas, deskriptor GRS harus dijabarkan secara eksplisit untuk menghindari ambiguitas makna "Baik" atau "Buruk". GRS melihat kualitas di balik tindakan, bukan hanya apakah tindakan itu dilakukan atau tidak.

VS

Daftar tilik hanya mencentang langkah. GRS menilai kualitas performa (Safety, Dexterity, Efficiency).

5 DIMENSI UTAMA

Berdasarkan tinjauan literatur mengenai kompetensi laboratorium, GRS untuk D3 TLM disarankan menggunakan 5 dimensi utama:

Safety

Teknik Aseptik & Biosafety

Dexterity

Keterampilan Psikomotor

Efficiency

Organisasi Kerja & Waktu

Product

Kualitas Hasil Akhir

Professional

Sikap & Integritas

MATRIKS PENILAIAN (SKOR 1-5)

1

SANGAT KURANG

Unsafe / Tidak Aman

Deskripsi Performa: Peserta tidak memahami prosedur dasar. Melakukan pelanggaran keamanan fatal yang membahayakan diri atau orang lain. Hasil kerja tidak layak.

• Ose tidak dipijarkan sebelum dipakai.
• Menumpahkan biakan bakteri tanpa desinfeksi.
• Membuka cawan petri terlalu lebar jauh dari api.
• Tidak menggunakan APD dengan benar.

2

KURANG

Below Expectations

Deskripsi Performa: Peserta ragu-ragu, sering melihat catatan/bingung. Teknik aseptik tidak konsisten (sering lupa). Membutuhkan instruksi ulang dari penguji. Kualitas hasil buruk.

• Gerakan kaku dan lambat.
• Goresan pada agar merobek media.
• Pewarnaan Gram tidak rata/kotor.
• Meja kerja berantakan dan tidak terorganisir.

3

CUKUP / BATAS LULUS

Borderline

Deskripsi Performa: Peserta memahami prosedur dan mampu menyelesaikan tugas dengan aman, meskipun lambat atau terlihat kurang percaya diri. Teknik aseptik terjaga secara umum. Hasil kerja dapat diterima (minimal).

• Melakukan sterilisasi ose dengan benar.
• Hasil pewarnaan dapat dibaca meski tidak sempurna.
• Waktu pengerjaan pas-pasan atau sedikit lewat.
• Sedikit kesalahan minor yang dikoreksi sendiri.

4

KOMPETEN / BAIK

Proficient

Deskripsi Performa: Peserta bekerja dengan lancar, terorganisir, dan percaya diri. Teknik aseptik menjadi kebiasaan otomatis. Efisien dalam penggunaan alat dan bahan. Hasil kerja baik.

• Transisi antar langkah mulus (fluid).
• Pengaturan meja kerja ergonomis (5S).
• Mikroskop fokus dengan cepat.
• Interpretasi hasil akurat dan tegas.

5

SANGAT BAIK / MAHIR

Expert

Deskripsi Performa: Peserta menunjukkan penguasaan tinggi. Sangat efisien, teknik sempurna, dan mampu mengantisipasi masalah. Bekerja dengan standar profesional laboratorium rujukan.

• Kualitas preparat/goresan sempurna (seperti buku teks).
• Kecepatan kerja optimal tanpa terburu-buru.
• Kesadaran situasi (situational awareness) terhadap kontaminasi sangat tinggi.

4.3 PENILAIAN KESELURUHAN

(Overall Global Rating)

Selain menilai per dimensi, penguji WAJIB memberikan satu skor final:

"Apakah mahasiswa ini LULUS atau TIDAK?"

Fail

Borderline Fail

Borderline Pass

Pass

Superior

Data "Overall Global Rating" inilah yang nantinya akan digunakan sebagai variabel independen (Sumbu X) dalam perhitungan Standard Setting metode Regresi Borderline.